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微柱凝膠卡交叉配血試驗常見問題及處理

交叉配血試驗的原理:在微柱凝膠介質中,紅細胞抗原與相應抗體結合,利用凝膠的空間位阻,經低速離心,凝集的紅細胞懸浮在凝膠上層,而未和抗體結合的紅細胞則沉于凝膠底部(管底尖部)。 


微柱凝膠卡交叉配血試驗的優點:微柱凝膠實驗(又名微柱凝膠血型卡法)有結果清楚明確、結果穩定可保存、靈敏度高、特異性強、可標準化操作、自動化程度高、可檢出IgG抗體、標本用量少、降低錯誤發生率的優點。微柱凝膠卡交叉配血試驗常見問題: 


1主側不凝集,次側凝集 


1.1微柱凝膠卡交叉配血試驗如果主側不凝集,而次側凝集,原因有:①患者的紅細胞已經包被了抗體(自身抗體,直接抗人球蛋白試驗即DAT陽性反應)。最常見的原因是患者有免疫系統疾病、腫瘤以及骨科患者。②供血者血漿中存在針對患者紅細胞的抗體。③患者與供血者的ABO血型不合。 


1.2處理 


1.2.1患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗:患者05%紅細胞懸液50ul加入合血卡主側或次側,立即離心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已設置好。),取出肉眼判定結果。如果為陽性結果,則說明患者自身紅細胞問題,即患者紅細胞已被致敏,此袋血可以發出,但報告寫清楚:主側不凝集,次側凝集,患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗陽性,請緩慢輸注。 


1.2.2如果患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗為陰性結果,則查找獻血員血漿中是否存在不完全抗體。用獻血員血漿作不完全抗體篩查試驗:08%標準紅細胞懸液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各50ul(1滴)加入相應凝膠管中,再加獻血員血漿50ul,37℃孵育15min,離心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已設置好。),取出肉眼判斷結果。如果為陽性結果,則說明獻血員血漿中存在不完全抗體,此袋血不能發出,必須換一袋血再重新合血 


1.2.3如果還查找不出原因,則請臨床重新抽取血液標本,用新標本重新合血。 


2主側凝集,次側不凝集 


2.1微柱凝膠卡交叉配血試驗如果主側凝集,次側不凝集,原因有:①患者或供血者ABO定型不正確,或二者的ABO血型不配合。②某些亞型的特異性非常強。③患者血清中存在同種抗體,與供血者紅細胞上的相應抗原發生了反應。④供血者紅細胞上已經包被了抗體。⑤患者血清不正常,患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐。 

2.2處理①重新鑒定血型,如屬血型錯誤,則重新用同型血合血。②如屬亞型,則此袋血不可以發出,必須換一袋血重新合血。③如果患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐,則立即停止輸注大分子藥物,2h后重新抽取血液標本,重新合血。 


3主次側均凝集 


3.1微柱凝膠卡交叉配血試驗如果主次側均凝集,原因主要是ABO血型的錯誤。 


3.2處理重新檢測受血者和獻血者的ABO血型(正反定型),必須用ABO、RHD血型定型試劑卡(單克隆抗體)(微柱凝膠卡)作血型鑒定,如果正反定型不符,要按相應方法處理,直到結果能做出合理解釋為止。 


注意事項:①抗人球蛋白凝膠合血卡必須標注患者姓名和獻血員血袋號(后4位),一卡可以合三袋血。②微柱凝膠卡的準備:合血前首先觀察微柱凝膠卡的外觀如有干膠、雜質、氣泡不可使用,然后用專用離心機離心3~4min。③紅細胞懸液濃度不可太濃或太淡,應以0.5%~0.8%為宜。④冬天可將生理鹽水37℃孵育后配紅細胞懸液,遇疑難情況,可用溫鹽水洗滌紅細胞后再作血型鑒定和合血。⑤血清、紅細胞懸液應加至卡反應室中。⑥可疑凝集時,則再離心5min,再觀察結果。⑦血清或血漿標本必須充分去纖維蛋白,否則標本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出,阻礙陰性紅細胞沉降,呈假陽性反應或出現混合凝集。若血漿標本上清液有絮狀物或顆粒,可將上清液再離心使纖維蛋白下沉。配紅細胞懸液時將吸頭申入管底部,避免吸入纖維蛋白。供血者血液標本必須離心,合血管的血漿與紅細胞交界處含有較多纖維蛋白,應把交界處剪掉。⑧某些疾病、藥物等可導致交叉配血不合,應加以區別。⑨異常血清蛋白及細菌可影響結果。⑩微柱凝膠卡應放在18~25℃儲存,應注意防重物壓、防高溫。 


總之,微柱凝膠卡交叉配血試驗中發現有不配合(一側凝集或兩側均凝集),首先應考慮受血者和供血者的ABO定型是否有錯,必須重新鑒定血型,包括RH血型,必須做不規則抗體篩查試驗。其次,應注意有無特異性同種抗體、特異性未知的同種抗體存在?;颊叩难迦粼谑覝?、37℃或抗人球蛋白中凝集所有其他紅細胞,造成交叉配血試驗困難時,應及時請示上級主管或主任。必要時請求上級血液中心指導和解決問題。


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